微生物培養步驟：
1.配置不同濃度的營(yíng)養液稀釋液:取營(yíng)養液1ml溶于9ml無(wú)菌水中,振蕩 5min配成10%的溶液.
2.將容器口靠近(注意不是對著(zhù))酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無(wú)菌水的試管中.以此類(lèi)推制成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.
3.將試管口靠近(注意不是對著(zhù))酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養皿中,在各培養皿上標上濃度.
4.將有細菌生長(cháng)的樣品容器口靠近(注意不是對著(zhù))酒精燈燈焰,用接種環(huán)挑取菌落上的少量菌體加入10%的營(yíng)養液中.把接種環(huán)放在酒精燈上灼燒滅菌,再次取樣加入盛1%的營(yíng)養液的培養皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰)中.重復這個(gè)操作,將各濃度的營(yíng)養液接上種.
5.輕輕搖勻接上種的培養皿,置于恒溫箱內37攝氏度保存,3天后就有菌落出現.
微生物培養的基本條件：
1、影響微生物生長(cháng)的因素
微生物的生長(cháng)，除了受本身的遺傳特性決定外，還受到外界許多因素的影響。影響微生物生長(cháng)的因素很多，簡(jiǎn)要介紹如下。
1） 營(yíng)養物濃度
細菌的生長(cháng)率與營(yíng)養物的濃度有關(guān):μ=μmax*C/(K C) ，營(yíng)養物濃度與生長(cháng)率的關(guān)系曲線(xiàn)是典型的雙曲線(xiàn)。
K值是細菌生長(cháng)的很基本的特性常數。它的數值很小，表明細菌所需要的營(yíng)養濃度非常之低，所以在自然界中，它們到處生長(cháng)。然而營(yíng)養太低時(shí)，細菌生長(cháng)就會(huì )遇到困難，甚至還會(huì )死亡。這是因為除了生長(cháng)需要能量以外，細菌還需要能量來(lái)維持它的生存。這種能量稱(chēng)為維持能。另一方面，隨著(zhù)營(yíng)養物濃度的增加，生長(cháng)率愈接近最大值。
2）溫度
在一定的溫度范圍內，每種微生物都有自已的生長(cháng)溫度三基點(diǎn)：最低生長(cháng)溫度、最適生長(cháng)溫度和最高生長(cháng)溫度。在生長(cháng)溫度三基點(diǎn)內，微生物都能生長(cháng)，但生長(cháng)速率不一樣。微生物只有處于最適生長(cháng)溫度時(shí)，生長(cháng)速度才最快，代時(shí)最短。超過(guò)最低生長(cháng)溫度，微生物不會(huì )生長(cháng)，溫度太低，甚至會(huì )死亡。超過(guò)最高生長(cháng)溫度，微生物也要停止生長(cháng)，溫度過(guò)高。也會(huì )死亡。一般情況下，每種微生物的生長(cháng)溫度三基點(diǎn)是恒定的。但也常受其它環(huán)境條件的影響而發(fā)生變化。
根據微生物最適生長(cháng)溫度的不同，可將它們分為三個(gè)類(lèi)型：
a.嗜冷微生物：其是適生長(cháng)溫度多數在-10℃－20℃之間
b.中溫微生物：其最適生長(cháng)溫度一般在20℃－45℃之間
c.嗜熱微生物：生長(cháng)溫度在45℃以上。
3）水分
水分是微生物進(jìn)行生長(cháng)的必要條件。芽孢、孢子萌發(fā)，首先需要水分。微生物是不能脫離水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生長(cháng)，而不能生活在純水中。各種微生物在不能生長(cháng)發(fā)育的水分活性范圍內，均具有狹小的適當的水分活性區域。
4）氧氣
按照微生物對氧氣的需要情況，可將它們分為以下五個(gè)類(lèi)型。
a.需氧微生物：這類(lèi)微生物需要氧氣供呼吸之用。沒(méi)有氧氣，便不能生長(cháng)，但是高濃度的氧氣對需氧微生物也是有毒的。很多需氧微生物不能在氧氣濃度大于大氣中氧氣濃度的條件下生長(cháng)。絕大多數微生物都屬于這個(gè)類(lèi)型。
