產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

樂(lè )業(yè)生產(chǎn)的AO/PI雙染試劑盒(細胞計數儀專(zhuān)用)，即AO/PI Double Staining Kit for Cell Counter，簡(jiǎn)稱(chēng)細胞計數儀專(zhuān)用AO/PI染料或AO/PI染液，是由吖啶橙(Acridine orange, AO)染色液和碘化丙錠(Propidium iodide, PI)染色液優(yōu)化比例混合而成，基于DNA探針雙染細胞核，快速、便捷檢測細胞活性的試劑盒。

本系列產(chǎn)品包括Set A、Set B和Set C三種，可以適用于對于熒光強度有不同要求的熒光細胞計數儀。Set A、Set B和Set C三種試劑盒的熒光由弱到強，Set A熒光相對最弱一點(diǎn)，Set C熒光相對最強一點(diǎn)。初次選購可以考慮嘗試Set B。通常熒光細胞計數儀拍攝熒光照片的時(shí)候相關(guān)參數也可以適當調節而適應不同熒光強度的染色的。如果這3個(gè)產(chǎn)品都不太適合蓋熒光細胞計數儀，可以選購AO/PI雙染試劑盒(測試裝, 細胞計數儀專(zhuān)用)自行測試適當的熒光染料用量，后續如有需要可以聯(lián)系樂(lè )業(yè)進(jìn)行定制。

AO是經(jīng)典的、極靈敏的特異染性熒光染料，可以標記DNA、RNA。該染料具有膜通透性，能透過(guò)細胞膜，使DNA和RNA染色，因此AO常用于細胞內DNA和RNA的熒光染色檢測。AO與核酸結合方式主要有兩種，分別為插入性結合和靜電吸引。插入性結合是指AO嵌入DNA雙鏈的堿基對之間，熒光發(fā)射峰為530nm，激發(fā)后呈綠色熒光。靜電吸引是指帶正電荷的AO與RNA或單鏈DNA的磷酸根(帶負電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結合，其熒光發(fā)射峰為640nm，激發(fā)后呈紅色熒光，少量結合會(huì )呈桔黃色或桔紅色熒光。

本試劑盒中AO與核酸結合的方式是插入性結合，因此激發(fā)后呈綠色熒光。經(jīng)AO染色后，正常細胞的細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中，因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體，AO使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片顆粒；而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。

PI是一種非細胞膜通透性熒光染料，與DNA結合后的最大激發(fā)光波長(cháng)為535nm，最大發(fā)射光波長(cháng)為617nm，不能穿過(guò)具有生物活性的細胞質(zhì)膜，只能對于壞死細胞因為其細胞膜缺乏完整性而能到達細胞核[1, 2]，并嵌入壞死細胞的DNA雙螺旋形成PI-DNA復合物從而產(chǎn)生紅色熒光，因此PI僅能對死細胞染色，因此被用來(lái)區分正常細胞與壞死細胞。須特別注意凋亡細胞會(huì )因為其細胞膜的完整性，而無(wú)法被PI染色，僅在凋亡后期發(fā)生繼發(fā)性壞死(Secondary necrosis)時(shí)，才能被PI染色。

本系列試劑盒操作簡(jiǎn)單，檢測速度快。本系列試劑盒提供即用型的AO/PI雙染試劑，使用時(shí)，僅需按照1:1的比例與細胞樣品混合即可。無(wú)需制備和稀釋各種溶液的繁瑣過(guò)程，免去制備和稀釋過(guò)程中可能產(chǎn)生的誤差，提高了檢測的精確度，整個(gè)染色過(guò)程5分鐘內可完成。

本系列試劑盒有不同檢測靈敏度的產(chǎn)品可供用戶(hù)選擇，適用于多種細胞計數儀。由于不同品牌熒光細胞計數儀熒光檢測的參數有差異，而且相應參數也可以自行調節，所以本系列產(chǎn)品根據其染色的強度分為Set A、Set B、Set C三個(gè)產(chǎn)品，綠色熒光的染色強度依次增強，用戶(hù)可根據實(shí)驗所用的細胞計數儀的特性進(jìn)行選擇。

按照每個(gè)樣品使用10μl染色液計算，本系列試劑盒每1ml可以進(jìn)行100次檢測。